Le test ELISA est un examen médical de laboratoire, au cours duquel se produit une réaction dite antigène-anticorps. Différents antigènes peuvent être testés qui jouent un rôle en médecine humaine ou vétérinaire. Seuls les instituts de laboratoire accrédités sont chargés d'effectuer le test en Allemagne.
Qu'est-ce que la procédure?
Dans les examens médicaux de laboratoire, le test ELISA fait partie des procédures dites immunologiques. Grâce à la procédure de test, les protéines molécules peut être détecté de manière très différente fluides corporels. ELISA est l'abréviation de Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay. Il s'agit donc d'une désignation de langue anglaise qui s'est toutefois imposée dans l'usage médical allemand. Le test ELISA fait partie des procédures dites immunologiques dans le cadre des examens médicaux de laboratoire. La procédure de test peut être utilisée pour détecter les protéines molécules dans une grande variété de fluides corporels. La détection de ces molécules permet à son tour de tirer des conclusions sur certaines maladies ou tableaux cliniques, c'est pourquoi les médecins font également dépendre leur diagnostic du résultat d'un tel test ELISA. La procédure de test est donc d'une grande importance dans la pratique clinique quotidienne, que ce soit en ambulatoire ou en milieu hospitalier. Le correspondant fluides corporels, par exemple entier sang ou fluides de les articulations, sont envoyés au laboratoire immédiatement après avoir été prélevés sur le patient. Ce sont généralement des échantillons assez urgents, car le matériel natif est considéré comme sensible et doit être examiné le plus rapidement possible. Les échantillons dits surstockés peuvent conduire aux résultats faussement négatifs car le pathologique protéines à détecter ont été réduits ou complètement dégradés entre-temps. Ainsi, les soi-disant préanalytiques jouent un rôle important dans l'ELISA; les résultats suspects ou négatifs doivent être répétés à nouveau si des symptômes cliniques appropriés sont présents.
Fonction, effet et objectifs
Pour des performances de test correctes dans un laboratoire médical accrédité, des tubes à essai et des plaques de microtitrage sont absolument nécessaires. Ces plaques à fines empreintes semi-concaves sont en plastique spécial et sont chacune revêtues d'un anticorps très spécifique. Si l'antigène à détecter est présent dans un fluide corporel à examiner, alors une réaction antigène-anticorps spécifique se produit selon le principe dit de verrouillage et de clé. Le matériau de l'échantillon peut être inséré dans les plaques soit manuellement par le personnel du laboratoire à l'aide de pipettes, soit de manière entièrement automatique. Dans les instituts médicaux de laboratoire modernes, seuls des systèmes entièrement automatisés sont utilisés pour les diagnostics ELISA. Cependant, ceux-ci doivent être surveillés par du personnel qualifié, des assistants de laboratoire médico-techniques. Le contrôle qualité dit interne et externe relève également de la responsabilité du personnel du laboratoire, supérieur au personnel médical de la médecine de laboratoire, maladie infectieuse épidémiologie et microbiologie. Après le premier lot de test, c'est-à-dire après que le matériel a été pipeté sur les plaques, les antigènes spécifiques de l'échantillon, s'ils sont présents, se sont déjà liés au anticorps sur la plaque en plastique. Un lavage avec une solution saline physiologique est ensuite effectué pour éliminer les facteurs interférents tels que les antigènes indésirables ou protéines de la préparation. Cette étape est très importante pour éviter les fausses réactions positives. Un faux résultat positif interprété par le laboratoire peut avoir des conséquences fatales pour un patient. Dans la deuxième étape du test, un autre anticorps est ajouté qui est couplé à une enzyme. Cet anticorps marqué se lie également à l'antigène. Dans une troisième et dernière étape, un colorant spécial est ajouté en une quantité définie, qui est plus ou moins dégradée par des résidus enzymatiques encore présents. Seule une telle enzyme peut être dégradée, qui n'était pas auparavant liée à l'antigène avec l'anticorps. L'enzyme libre est capable de cliver le colorant ajouté. La quantité exacte de colorant clivé peut être déterminée avec précision avec une autre méthode de laboratoire, la soi-disant photométrie. Cela permet de tirer des conclusions précises sur la présence ou non d'antigène dans un échantillon et, dans l'affirmative, dans quelle mesure.Le test ELISA est utilisé non seulement pour le diagnostic initial ou pour confirmer les diagnostics suspects de certaines maladies et tableaux cliniques, mais aussi pour suivre leurs progrès. Si l'antigène concentration dans le test devient plus faible au cours de thérapie, la thérapie est considérée comme réussie.
Risques, effets secondaires et dangers
Le test ELISA tire sa valeur informative principalement de la détection de structures antigéniques dans les fluides corporels. Le test permet une déclaration dite qualitative, mais aussi semi-quantitative et quantitative sur la présence suspectée de certains antigènes dans les fluides corporels. Ensemble sang ne peut pas être utilisé pour le test, uniquement du sérum sanguin. Un test direct sur le patient, par exemple à partir du capillaire sang des bout du doigt, n'est donc pas possible à ce jour, comme pour certains autres tests sérologiques. En médecine humaine, le test ELISA est principalement utilisé pour détecter les antigènes dans les infections bactériennes, virales ou fongiques. De plus, tous les résultats positifs de hépatite la sérologie est à nouveau vérifiée avec un test ELISA en standard. Certain hormones, par exemple le grossesse l'hormone HCG, peut également être déterminée avec le test ELISA. Si certaines complications surviennent pendant grossesse, une connaissance précise du concentration de l'hormone de grossesse dans le sang est très utile sur le plan diagnostique et thérapeutique. Une autre indication pour le test est la détection de soi-disant paraprotéines dans l'urine, telles qu'elles se produisent, par exemple, dans divers maladies tumorales, comme le myélome multiple. Le test ELISA est encore effectué dans de nombreux laboratoires aujourd'hui, mais il est considéré comme dépassé par les experts. La réaction immunitaire couplée à enzymes dans le test ELISA a été de plus en plus remplacé ces dernières années par des anticorps, qui fournissent un résultat de mesure quantitatif encore meilleur. Ces tests sont également appelés RIA, Radio Immunabsorbent Assay. D'autres avancées spécifiques de l'ELISA sont les méthodes chimiques légères telles que la luminescence ou la fluorescence.
