Célibataire-gène l'analyse est une méthode de test génétique ciblée.
Dans le cadre de cette procédure, si une maladie héréditaire est suspectée, qui est déclenchée par une seule modification d'un gène, le gène suspecté comme causal est examiné. Cela se fait aussi souvent dans le cadre des examens de dépistage.
Indications (domaines d'application)
- Diagnostic des maladies monogéniques, par exemple fibrose kystique.
La procédure
Matériel nécessaire
- Sang d'héparine (minimum 1 à 2 ml)
Préparation du patient
- Pas nécessaire
Facteurs perturbateurs
- Aucune connue
La méthode de laboratoire
Le plus souvent, la méthode de séquençage utilisée en simplegène l'analyse est la méthode Sanger, également appelée synthèse de terminaison de chaîne, où il s'agit d'abord d'isoler l'ADN du sang. Alors tout Hydrogénation les liaisons qui servent à maintenir ensemble l'ADN à deux brins sont rompues. Après chauffage à 94-96 ° C pendant une minute, deux brins simples sont présents. Ensuite, la soi-disant hybridation d'amorce se produit, moyennant quoi une amorce est attachée. Cela a lieu à environ 60 ° C. Une amorce est un oligonucléotide (oligomères composés de quelques nucléotides) qui sert de point de départ pour la réplication de l'ADN enzymes comme l'ADN polymérase. Après l'hybridation des amorces, une extension a lieu, dans laquelle la température est élevée à 72 ° C. Cela permet à l'amorce de se fixer à l'ADN polymérase (enzymes qui synthétisent l'ADN). Après une moyenne de 30 cycles, la procédure peut être arrêtée.
Une analyse plus approfondie est effectuée par capillaire électrophorèse dans des séquenceurs automatisés. Le résultat est appelé un électrophorégramme. Cela montre différentes couleurs indiquant la séquence de base.
Par cette méthode, des mutations impliquant une seule base nucléique dans un gène, également appelées mutations ponctuelles, peuvent être détectées.
