Les diagnostics de pré-fécondation offrent la possibilité d'effectuer des tests génétiques sur des œufs dans le cadre de la fécondation in vitro (FIV). Les tests sont effectués sur le chromosomes des 1er et 2ème corps polaires, qui se forment lors de la 1ère et 2ème division de maturation après l'introduction d'un mâle sperme dans l'oeuf. La méthode présente l'avantage de ne pas être un diagnostic génétique préimplantatoire de jure (DPI) car l'examen est effectué avant la fusion des noyaux femelle et mâle, de sorte que le diagnostic génétique de pré-fécondation est autorisé dans certains pays interdits de DPI.
Qu'est-ce que le diagnostic de pré-fertilisation?
Les diagnostics de pré-fécondation offrent la possibilité d'effectuer des tests génétiques sur des œufs dans le contexte de la fécondation in vitro. Les diagnostics de pré-fécondation permettent de détecter des aberrations chromosomiques sur le génome haploïde de l'ovocyte femelle dans le contexte de la fécondation in vitro (FIV). En particulier, les écarts numériques de certains chromosomes (aneuploïdie) et des anomalies de certains gènes responsables de maladies héréditaires peuvent être détectées. Quand un homme sperme est introduit dans le cytoplasme de l'ovule lors de la FIV, ce premier initie les 1ère et 2ème divisions de maturation (méiose I et II) dans l'ovule. Dans chaque cas, deux cellules «superflues», les corps polaires, qui ont le même ensemble de chromosomes comme l'ovocyte lui-même, sont produits à la suite de la division. Les corps polaires, qui seraient normalement décomposés par le corps, sont éliminés par le corps polaire biopsie en analyse chromosomique. Étant donné que le diagnostic de préfertilité est toujours effectué sur les corps polaires, la procédure est également appelée diagnostic du corps polaire (PCD). L'avantage de la méthode d'examen est qu'elle peut être pratiquée même dans certains pays où le diagnostic génétique préimplantatoire (DPI) est interdit, car l'examen est effectué sur le génome de l'ovule lorsque les noyaux du sperme cellule et l'ovule n'ont pas encore fusionné. L'inconvénient est que seules les aberrations chromosomiques du génome maternel peuvent être examinées. Les chromosomes du sperme introduit dans le cytoplasme de l'ovule ne peuvent pas être détectés par cette méthode. Les maladies liées à l'Y ne peuvent pas être détectées car l'ensemble chromosomique haploïde de l'ovocyte ne peut pas contenir de chromosome Y.
Fonction, effet et objectifs
Les diagnostics de pré-fertilisation sous la forme de tests génétiques du corps polaire peuvent détecter des anomalies numériques (aneuploïdie) dans certains chromosomes du génome maternel, ainsi que des translocations par lesquelles des segments chromosomiques ont été séparés et réinsérés au mauvais endroit. De plus, lié à X gène des mutations peuvent être diagnostiquées héritées de la mère et basées sur la mutation d'un seul gène (maladie monogénétique). Cela nécessite que la maladie héréditaire potentielle soit connue afin de cibler un gène sur le chromosome X. Dans le cas de l'hérédité récessive, il y a une chance que le chromosome X du corps polaire - et donc aussi le chromosome X de l'œuf fécondé - contienne l'allèle sain de l'ovule correspondant gène. La procédure elle-même implique un corps polaire biopsie, dans lequel les deux corps polaires haploïdes sont retirés de l'œuf et les chromosomes sont ensuite soumis à FISH (hybridation in situ par fluorescence) test. le biopsie des corps polaires pose un énorme défi au laboratoire qui effectue le test car l'identification et l'isolement des corps polaires nécessitent une certaine expérience. Pour la procédure de test FISH, ce que l'on appelle des sondes ADN sont disponibles pour des chromosomes sélectionnés, qui se combinent avec les chromosomes haploïdes correspondants parce qu'ils ont la séquence d'acides aminés complémentaire. Les sondes ADN sont marquées avec différentes couleurs fluorescentes afin que les chromosomes puissent ensuite être identifiés à l'aide d'un logiciel spécial et comptés dans une procédure automatisée. La plupart des aberrations chromosomiques telles que les aneuploïdies et les déplacements chromosomiques dans un chromosome sont mortelles. Cela signifie que soit aucun zygote ne se forme pendant la FIV, soit le embryon est rejeté après transplanter into the utérus, ou il y a tôt ou tard fausse couche. Depuis la fréquence des aberrations chromosomiques chez les femmes des œufs augmente avec l'âge, un objectif important du diagnostic de la préfertilité est une sélection positive d'œufs fécondés.Seuls les œufs fécondés avec - autant que reconnaissable - le génome intact sont repiqués dans le utérus. La sélection positive vise à augmenter la grossesse taux après FIV et réduire le taux d'ovules fécondés rejetés et le nombre de fausses couches. Un autre objectif est d'exclure d'emblée les maladies héréditaires basées sur des aberrations chromosomiques ou certains défauts génétiques dans l'œuf fécondé repiqué par sélection positive des œufs fécondés. Les maladies héréditaires typiques qui peuvent être exclues par le test comprennent fibrose kystique, atrophie musculaire spinaleet drépanocytose anémie.
Risques, effets secondaires et dangers
Les diagnostics de pré-fécondation sont réalisés à l'extérieur du corps et ne présentent donc aucun risque physique supplémentaire pour la femme impliquée. Les risques physiques mineurs de blessure et d'infection ne sont associés qu'à la récupération des ovules. Contrairement au DPI, qui implique également un examen chromosomique par test FISH, dans le diagnostic de la préfertilité, seul le matériel chromosomique et génétique de la mère peut être examiné. Cela signifie que si le test FISH est négatif et qu'aucune aberration chromosomique ou génétique n'est diagnostiquée, les parents peuvent avoir des attentes trop positives quant à l'évolution de la maladie. grossesse et la naissance ultérieure. Les aberrations chromosomiques du génome paternel et les anomalies éventuellement existantes du chromosome Y, qui peuvent provoquer une maladie héréditaire liée au sexe, ne sont pas enregistrées. À cet égard, les diagnostics de pré-fécondation sont encore plus incomplets que le DPI, dans lequel l'ensemble du génome du embryon peut être examiné au stade blastula. Cependant, même en cas de DPI négatif, il ne peut être exclu que des anomalies génétiques soient présentes dans le génome du embryon, ce qui peut entraîner un mauvais développement et éventuellement conduire aux déficiences après la naissance. Le test FISH ne peut se référer qu'à certains chromosomes et gènes sélectionnés.
