L'hybridation in situ par fluorescence (FISH) est une méthode de criblage génétique pour la détection de l'ADN (acide désoxyribonucléique) dans les noyaux de cellules individuelles.
Cette méthode implique l'utilisation de sondes ADN spécifiques qui ne peuvent fournir que des informations sur les régions génomiques pour lesquelles la sonde utilisée est spécifique.
Indications (domaines d'application)
- Suspicion d'aberration chromosomique numérique:
- Détection d'anomalies chromosomiques numériques (par exemple, trisomie 21).
- Pour la quantification des mosaïques pour les aberrations chromosomiques (par exemple, dans Ullrich-syndrome de Turner).
- Détection des microdélétions (par exemple, monosomie 22q11.2).
- Détection des aberrations chromosomiques (par exemple, la leucémie lymphocytaire chronique (LLC), non hodgkinien lymphome).
Les indications ci-dessus sont analysées par interphase FISH (voir «Procédure de laboratoire» pour plus de détails).
La procédure
Matériel requis
- Sang d'héparine (minimum 1 à 2 ml)
Préparation du patient
- Pas nécessaire
Facteurs perturbateurs
- Aucune connue
La méthode de laboratoire
L'hybridation in situ par fluorescence (FISH) implique l'utilisation de sondes ADN marquées par fluorescence (sondes FISH). Ceux-ci peuvent se lier à un site d'ADN spécifique sur un chromosome, ce qui s'appelle l'hybridation. Lors de ou après la liaison de la sonde marquée par fluorescence, l'évaluation peut être effectuée à l'aide d'un microscope. Dans ce processus, le nombre de signaux de fluorescence dans les noyaux interphase est déterminé. En outre, une évaluation de l'emplacement (par exemple, translocation / déplacement de l'emplacement / vers un autre chromosome) en métaphase chromosomes est possible.
Lorsque différent fluorescent teintures sont utilisés pour différents ADN cibles dans la procédure FISH, il est appelé FISH multicolore. Cela permet une visualisation complète du génome.
Dans certains cas, la sonde ADN n'est pas directement marquée avec un colorant fluorescent, ce que l'on appelle une procédure indirecte. Au lieu de cela, il est étiqueté avec des substances telles que biotine ou digoxigénine. Cette méthode est considérée comme plus compliquée mais est plus sensible.
