Microscopie à contraste de phase

La microscopie à contraste de phase est une procédure de diagnostic indispensable en gynécologie qui facilite grandement l'examen des cellules vitales de la glaire cervicale (glaire cervicale) et des sécrétions vaginales (liquide vaginal). De plus, cette procédure permet également d'évaluer sperme (cellules de sperme).

Indications (domaines d'application)

  • Diagnostics de flore vaginale - lors de l'examen de la flore vaginale (flore vaginale), les examens suivants sont possibles par microscopie à contraste de phase: par exemple, le diagnostic d'une absence de colonisation bactérienne ou d'une flore vaginale normale (acide lactique les bactéries) avec ou sans cytolyse (destruction cellulaire) peut être réalisée à l'aide de cette procédure de diagnostic. De plus, il est possible d'identifier les bactéries dans la préparation et de les classer dans les groupes de bactéries immobiles et mobiles. En outre, les flagellés tels que Trichomonas vaginalis, qui appartiennent au groupe des parasites, peuvent généralement être détectés de manière fiable par le microscope à contraste de phase. De plus, les mycoses (maladies fongiques) peuvent être détectés de manière fiable en microscopie à contraste de phase, de sorte que le diagnostic de mycose du muguet peut être fait à l'aide de la microscopie à contraste de phase. Sur la base de ces capacités de diagnostic, la détection d'une cause cervicale infectieuse de stérilité est généralement possible.
  • Marqueurs inflammatoires - par microscopie à contraste de phase, le nombre et le type de leucocytes (morphologie des leucocytes) peut être déterminée.
  • Détermination de la phase du cycle - la cytologie vaginale est utilisée pour déterminer les phases du cycle du cycle menstruel. Dans cette étape d'examen, les cellules superficielles (superficielles) du vagin (vagin) sont examinées au microscope. L'évaluation cellulaire fournit des informations sur la phase actuelle du cycle menstruel de la femme.Le cycle féminin est divisé en deux phases, la première phase est appelée phase folliculaire (phase de maturation de l'œuf) et la deuxième phase du cycle est appelée phase du corps jaune (corpus phase luteum). Cependant, il convient de noter que la détermination de la phase du cycle au moyen de la microscopie à contraste de phase a maintenant été largement remplacée par le diagnostic hormonal, ce qui garantit un degré élevé de certitude diagnostique.
  • Test de Sims-Huhner - cette procédure de test, également appelée test post-coïtale, est utilisée pour déterminer si sperme (spermatozoïdes) peuvent pénétrer dans la glaire cervicale (glaire cervicale) pour atteindre le site de fécondation.
  • Évaluation de sperme - en plus d'évaluer la capacité des spermatozoïdes à pénétrer (passer à travers) la glaire cervicale, la microscopie à contraste de phase permet d'examiner plus en détail le nombre de spermatozoïdes, leur motilité et leur morphologie (apparence).
  • Examen des frottis - en cas de suspicion, par exemple, mycose (maladie fongique), il existe la possibilité d'un frottis du vagin (vagin) ou de la vulve (la totalité des organes sexuels primaires externes d'une femme. lèvre et le clitoris) ou éventuellement de la région anale à prélever et à évaluer au microscope.

Préparation de microspie à contraste de phase à l'aide de l'exemple de l'évaluation de la sécrétion vaginale présente:

  • Au début de l'évaluation des sécrétions vaginales par un microscope à contraste de phase, la préparation de deux préparations natives appropriées (préparation fraîche, non fixée, généralement non colorée de fluides corporels, les tissus ou le contenu des organes pour la détection microscopique des agents pathogènes vivants) doivent être effectués.
  • L'ajout de potassium une solution d'hydroxyde (KOH) et du sel de table à la sécrétion vaginale est effectuée. Une fois le mélange terminé, la sécrétion combinée est appliquée sur une lame et recouverte d'une lamelle. Par la suite, l'évaluation microscopique à contraste de phase peut être effectuée.

La procédure

Le principe de la microscopie à contraste de phase est basé sur l'interférence des rayons lumineux dans le trajet du faisceau du microscope, ce qui permet d'obtenir une image à contraste élevé de cellules non colorées. Structure et fonction du microscope à contraste de phase:

  • L'ouverture annulaire, le condenseur, la plaque de phase annulaire et l'objectif sont particulièrement importants pour le fonctionnement du microscope à contraste de phase. En insérant l'ouverture annulaire dans le condenseur et la plaque de phase dans l'objectif, une séparation des faisceaux lumineux non diffractés et diffractés est provoquée.Le retard résultant de la longueur d'onde des rayons lumineux diffractés provoque une différence de phase qui rend optiquement les détails structurels. de l'objet microscopique à examiner apparaissent plus foncés que le milieu environnant. Physiquement, la phase Plaquettes convertir les différences de phase ou de trajet en différences d'amplitude. Du fait de ces différences d'amplitude, l'image de l'objet apparaît au microscope par annulation ou amplification mutuelle des rayons lumineux directs traversant l'objet et diffractés au niveau de l'objet.
  • Ainsi, un inconvénient de ce principe est le fait que les préparations de phase idéales ne sont pas la règle, car les effets d'amplitude se superposent généralement aux effets de phase.
  • Sur la base du principe d'imagerie des structures par différences d'amplitude, les structures cellulaires existantes sont représentées sous forme de nuances de gris graduées en fonction de leur propre optique. densité. Pour améliorer la reproduction des structures, l'utilisation de préparations minces et de phase Plaquettes est indiqué. En fonction de la nature des différentes phases Plaquettes, des contrastes de phase positifs et négatifs peuvent être obtenus, ce qui rend les objets d'intérêt plus sombres ou plus clairs que leur environnement.
  • En microscopie à contraste de phase, il est également important de noter que nécrose (mort des cellules) peut se produire relativement rapidement en raison de l'exposition à la lumière et de dommages supplémentaires aux cellules vitales. À la suite de cette rapide nécrose développement, l'évaluation des lames doit être réalisée dans un délai d'une à deux heures afin de maintenir le validité de la mesure diagnostique. Ainsi, cette limitation de temps sur l'évaluation des échantillons vitaux nécessite généralement une documentation par microphotographie ou, si nécessaire, en effectuant une microkinématographie. Une photomicrographie est une photographie d'une image microscopique prise avec une caméra attachée à un microscope. Grâce à la microkinématographie, il est possible de capturer des objets sous observation microscopique dans des images en mouvement.

Avantages de la microscopie à contraste de phase:

  • Diagnostics immédiats - gain de temps et peu coûteux à réaliser.
  • Relativement facile à réaliser et donc rapidement enseignable et apprenable.
  • En fonction de l'expérience de l'investigateur avec une sensibilité relativement bonne (pourcentage de patients malades chez lesquels la maladie est détectée par l'application de la procédure, c'est-à-dire une constatation positive se produit) et la spécificité (probabilité que des personnes réellement en bonne santé ne souffrent pas du la maladie en question sont également détectées comme saines par la procédure) affligées
  • Le diagnostic est faisable sans assistance extérieure (c'est-à-dire sans laboratoire tiers).